1.新型弧菌的鉴定
弧菌菌株为本实验室5-6月份从海南沿海对虾养殖场中南美白对虾体内分离到。采用TCBS平板分离纯化,挑选黄色单克隆菌株,经分子生物学实验鉴定,对toxR基因进行序列分析和同源性比对,与副溶血弧菌的同源性高达100%,如图1所示;对rpoD基因进行序列分析和同源性比对,显示与溶藻弧菌的同源性高达100%,如图2所示;该菌在TCBS平板上生长如图3所示。弧菌在TCBS上的显色特征和基因序列同源性分析的结果表明,该黄弧菌为溶藻弧菌。与以往接触的溶藻弧菌不一样的是,这株溶藻弧菌的toxR基因与副溶血弧菌的toxR基因序列一致。
图1 toxR基因测序峰图及序列比对
图2 rpoD基因测序峰图及序列比对
图3 在TCBS上的生长
2.副溶血弧菌和溶藻弧菌的致病性比较
2.1副溶血弧菌
研究发现,急性肝胰腺坏死综合症(EMS),导致该病是一种具有两种毒力因子PirA、PirB的弧菌感染引起的,其中大多数是副溶血弧菌。该病发生后呈现发病范围广、速度快、发病季节不明显的特点。从症状上看,多表现为空肠、空胃、偷死等症状。肝胰脏肿大,质地松软,出现肝胰脏明显萎缩。对虾发病期间,通常在池塘水在缓慢流动或趴伏于池塘边坡上,失去食欲,空肠空胃,该病病情发展十分迅速,死亡率和排塘率极高,从发病少量到排塘,时间最短仅2~3天。
表1 由溶藻弧菌引起的对虾主要疾病
综上所述,在对虾养殖中,副溶血弧菌的致病风险高于溶藻弧菌、副溶血弧菌的致病毒力也强于溶藻弧菌。
3.讨论
(1)推测副溶血弧菌的toxR基因已出现基因水平转移;
(2)副溶血弧菌和溶藻弧菌的致病性症状、毒力强弱,对药物的敏感、耐药都不同,应以区分,避免滥用药物,以免破坏对虾以及水体中的微生物群落,降低对虾免疫力,破坏水体稳定性。
(3)该株黄弧菌先后在海南、山东检出,有在全国扩散的趋势,苗场/养殖户在弧菌检测中,应避免将该株黄弧菌误检为副溶血弧菌。
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