冻干型核酸检测试剂——实验操作注意事项及试剂储存条件

2024-10-17
冻干型核酸检测试剂由于具有可常温储运、操作简便（无需繁琐反应体系配制）、性能稳定等特点，越来越广泛应用于分子生物学实验。接下来，小编对华峰生物冻干型核酸检测试剂（PCR/ RT- PCR荧光探针法)的实验操作注意事项及试剂储存条件做一介绍。
一、操作注意事项
1. 实验操作前把所需物品准备齐全；
2. 实验室应严格分区操作，各区物品应专用，不得交叉使用，避免污染；
3. 从密封袋中取出试剂后应及时做好标记，避免检测指标混乱；
4. 冻干试剂使用前应检查试剂状态，试剂受潮萎缩即失效，不应继续使用；若白色颗粒不在管底，可轻甩 PCR 管，将冻干颗粒抖至管底；
5. -20℃的样本 DNA，加样前应室温解冻，做短暂离心后使用；
6. 试剂盒内的阳性对照应视为具有污染性物质，应注意避免污染其他样本和反应试剂；
8. 加样完成后应轻弹管底或涡旋震荡混匀，避免冻干试剂溶解不充分而导致荧光曲线异常；
9.试剂混匀后，应高速离心 30s-1min再上机，避免管内气泡影响荧光曲线判读；
10．检测 RNA 病毒时，应使用无 RNA 酶的耗材；
11. 每次程序运行完后，应等仪器降至室温再打开仪器热盖，避免产物泄露污染实验室；用过的PCR试剂管用保鲜袋或者一次性手套等包裹好，及时带离实验室区域，按规定处理；
12. 做完实验，应及时对各实验区域进行清理，定期消毒或通风处理。
二、试剂储存条件
1.阳性对照复溶后，每次使用完毕，应及时-20℃储存；
2.冻干试剂是用铝箔袋包装的，应避免挤压，以免包装破损或试剂管变形而导致试剂失效或影响使用效果；冻干试剂、复溶液、超纯水等放阴凉处储存，避免阳光直晒；
3.使用八联管时，铝箔袋中的冻干检测试剂可分多次使用，剪取所需数量检测试剂，剩余检测试剂放在铝箔袋最里面，将袋内空气尽量排出，锁好密封条，从开口端将铝箔袋折起，尽量多折几道，最后用燕尾夹将袋子夹好，阴凉处室温避光储存。为防止吸潮，铝箔袋拆封后，请尽快使用完毕。

PCR技术具有重复性好、灵敏度高、快速简便等突出优点，是科研研究最常用的技术之一。但由于其灵敏度高，实验操作人员细微的操作失误就可能导致各种问题，因此，进行PCR操作时，操作人员应该严格遵守一些操作规程，最大程度保证结果的准确性。


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